Bovine Viral Cirital Virus Antibody ELISA Kit

Spesifikasi

 

Prosedur & Tafsiran Ujian

 

Prosedur Ujian Langkah 1

1.1 Penyediaan penyelesaian basuh

Wkepekatan orking wcecair ashing:Sebelum digunakan, larutan basuh harus dipulihkan ke suhu bilik (20-25 darjah) dan digoncang secara merata untuk menjadikannya seragam. Kemudian cairkan 20 kali larutan basuh pekat dengan air yang disucikan (contohnya, larutan basuh 5ml ditambah kepada air yang disucikan 95ml), campurkan dengan baik, dan cecair basuh yang dicairkan dapat disimpan pada 2-8 selama 7 hari.

1.2 Penyediaan sampel

① Seluruh darah haiwan diambil, disentrifugasi pada 4000rpm selama 10 minit, dan supernatan dikumpulkan. Serum juga boleh dibekukan secara semulajadi tanpa hemolisis.

② Cairkan sampel serum 1:50 (tambah sampel serum 3ul hingga 147ul sampel) dan campurkan dengan teliti.

Nota: Kawalan negatif dan positif juga perlu dicairkan.

1.3 Penyediaan Konjugasi Enzim

Cairkan enzim Conjugate 1: 250 (tambah 2UL enzim konjugat (x100) hingga 498ul sampel pencair) dan campurkan dengan teliti.

1.4 Prosedur Ujian

①Buat mikroplat label enzim (mengikut bilangan sampel, boleh dibongkar dan digunakan beberapa kali), tambahkan 100ul serum yang dicairkan ke mikroplat label enzim, tetapkan dua telaga masing -masing untuk sampel negatif dan positif, dan tambahkan 100ul setiap satu untuk negatif dan kawalan positif terhadap tindak balas masing -masing. Perlahan -lahan goncang sampel di dalam telaga, menggunakan filem plat pengedap untuk menutupi pinggan, dan inkubasi pada 37 darjah selama 30 minit.

② Buka filem plat pengedap, goncangkan larutan di dalam plat dengan baik, tambah 300μl cecair membasuh cecair ke setiap sumur, dan kemudian buang cecair di dalam telaga. Ulangi langkah -langkah di atas 5 kali, dan akhirnya pat kering pada kertas penyerap yang bersih.

③add 100μl enzim konjugasi ke setiap sumur, tutup plat, dan inkubasi pada 37 darjah selama 45 minit.

④ Buka filem plat pengedap, goncangkan larutan di dalam plat dengan baik, tambah 300μl cecair membasuh cecair ke setiap sumur, dan kemudian buang cecair di dalam telaga. Ulangi langkah -langkah di atas 5 kali, dan akhirnya pat kering pada kertas penyerap yang bersih.

⑤Add 100μl Substrate Solution Untuk setiap sumur, tutup plat dan inkubat selama 10 minit pada 37 darjah dari cahaya.

⑥Add 50μl Hentikan penyelesaian untuk setiap sumur, dan tentukan hasilnya dalam masa 5 minit.

 

Tafsiran Hasil Langkah 2

 

Nilai OD450 setiap telaga dibaca pada pembaca mikroplat 96-.

2.1 Pengesahan

Purata nilai OD450nm kawalan negatif adalah<0.1 and the average OD450nm value of positive control /the average OD450nm value of negative control was ≥3, the experimental results were valid. Otherwise, the test should be repeated.

2.2 Kaedah pengiraan

Bagi setiap sampel, hitung S/P seperti berikut menggunakan nilai sampel dan kawalan yang diperbetulkan:

2.3 Tafsiran Hasil

Apabila s/p<0.25, it is judged as negative.

Apabila s/p lebih besar daripada atau sama dengan 0. 35, ia dinilai sebagai positif.

Bila 0. 25 kurang daripada atau sama dengan s/p<0.35, it is judged as suspicious, and suggest to repeat sampling and test one week later.

 

Cool tags: Bovine Viral Cirital Virus Antibody ELISA Kit, China Bovine Viral Virus Virus Antibody Antibody ELISA Kit Pembekal, Pengilang, Kilang